Dag 4

Dagens laborations frågor:

Nu har du gjort både PCR och Southern. Syftet med bägge metoderna var att ta reda på om LL 37-genen fanns i plasmiden. Jämför resultatet och diskutera för-och nackdelar med metoderna.

Vad tycker du är det viktigaste som du har lärt dig under laborationen?  

om vi jämför bilden av gelen från PCR-reaktionen med membranet från southern blottingen så kan vi dra slutsatsen att den största skillnaden var tydligheten av ll37 bilden. Vid PCR reaktionen hade vi ett band men detta syndes starkare på membranet.  Fördelen med att göra en PCR reaktion är att man sparar tid och flera analyser kan utföras samt att med endast små mängder av ett prov få en bra detektion. Men att den lätt kan ge falska svar pga att det är separata steg för amplifieringen vilket kan öka risken för kontamination.

Med hjälp av southern blot så bekräftade vi att vi har LL37 igen. Det starka bandet som syns i höger brunn är vår gen som hybridiserats med proben. Nackdelen med southern är väl att den tar tid och det är väldigt många steg man bör hålla koll på samt att det var för långa vänte tider, men medan man väntade så fanns det vissa lösningar som kunde förberedas vilket var positivt.

Det jag lärt mig från denna laboration är att planera min dag ,läsa kompendiet noggrant samt att arbeta självständigt och lita på mig själv även om man ibland kan göra misstag. gör man ett misstag så ska man bara gå tillbaka och lösa det =) sen är det bara att fortsätta med laborationen. Att använda mina praktiska kunskaper på labb är nog också en av de sakerna jag fått lära mig bättre dvs så som pipetterings teknik, namn påmaterial ,beräkning osv.